วิธีปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ: 10 ขั้นตอน

สารบัญ:

วิธีปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ: 10 ขั้นตอน
วิธีปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ: 10 ขั้นตอน

วีดีโอ: วิธีปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ: 10 ขั้นตอน

วีดีโอ: วิธีปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ: 10 ขั้นตอน
วีดีโอ: เทคนิคการแยกเชื้อบริสุทธิ์ บทปฏิบัติการที่ 8 2024, มีนาคม
Anonim

เคยต้องการที่จะเติบโตแบคทีเรียสำหรับโครงการวิทยาศาสตร์หรือเพื่อความสนุกสนาน? มันง่ายอย่างน่าประหลาดใจ - สิ่งที่คุณต้องมีคือวุ้น (วัสดุสำหรับปลูกวุ้นพิเศษ) ชุดจานเพาะเชื้อที่ผ่านการฆ่าเชื้อและแหล่งแบคทีเรียที่น่าขยะแขยง!

ขั้นตอน

ตอนที่ 1 จาก 3: การเตรียมจานเพาะเชื้อ

ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 1
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 1

ขั้นตอนที่ 1. เตรียมวุ้น

วุ้นเป็นสารเจลาตินที่ใช้เพาะเชื้อแบคทีเรีย มันทำมาจากสาหร่ายสีแดงชนิดหนึ่งซึ่งเป็นพื้นผิวที่เหมาะสำหรับการเจริญเติบโตของแบคทีเรียหลายชนิด วุ้นบางชนิดมีสารอาหาร (เช่น เลือดแกะ) ซึ่งช่วยส่งเสริมการเจริญเติบโตของแบคทีเรียที่แข็งแรงขึ้น

  • วุ้นชนิดที่ง่ายที่สุดที่จะใช้สำหรับการทดลองนี้คือวุ้นที่มีลักษณะเป็นผง คุณจะต้องใช้ผงวุ้น 1.2 กรัม (ประมาณ 1/2 ช้อนชา) สำหรับจานเพาะเชื้อขนาด 4 นิ้วแต่ละจานที่คุณต้องการใช้
  • ในจานหรือชามที่ทนความร้อน ให้ผสมผงวุ้น 1/2 ช้อนชากับน้ำร้อน 60 มล. (ประมาณ 1/4 ถ้วย) คูณจำนวนเหล่านี้ด้วยจำนวนจานเพาะเชื้อที่คุณต้องการใช้
  • วางชามหรือจานในไมโครเวฟและเคี่ยวเป็นเวลาหนึ่งนาที เฝ้าดูเพื่อให้แน่ใจว่าสารละลายวุ้นไม่ล้น
  • เมื่อสารละลายพร้อม ผงวุ้นควรละลายจนหมดและของเหลวควรใส
  • ปล่อยให้สารละลายวุ้นเย็นสักครู่ก่อนดำเนินการต่อ
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 2
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 2

ขั้นตอนที่ 2. เตรียมจานเพาะเชื้อ

จานเพาะเชื้อเป็นภาชนะก้นแบนขนาดเล็กที่ทำจากแก้วใสหรือพลาสติก พวกเขามีสองส่วน - บนและล่าง - ที่พอดีกัน สิ่งนี้ช่วยปกป้องเนื้อหาจากอากาศที่ปนเปื้อนที่ไม่ต้องการ แต่ยังช่วยให้ก๊าซที่ผลิตโดยแบคทีเรียสามารถหลบหนีได้

  • จานเพาะเชื้อต้องผ่านการฆ่าเชื้ออย่างสมบูรณ์ก่อนนำไปใช้ในการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย มิฉะนั้น ผลการทดสอบอาจได้รับผลกระทบ จานเพาะเชื้อที่ซื้อมาใหม่ต้องผ่านการฆ่าเชื้อล่วงหน้าและปิดผนึกในภาชนะพลาสติก
  • นำจานเพาะเชื้อออกจากบรรจุภัณฑ์และแยกทั้งสองส่วนออก เทสารละลายวุ้นร้อนลงในครึ่งล่างของจานเพาะเชื้ออย่างระมัดระวัง - เพียงพอที่จะสร้างชั้นที่ด้านล่างของจาน
  • วางครึ่งบนของจานเพาะเชื้ออย่างรวดเร็วเพื่อป้องกันไม่ให้แบคทีเรียในอากาศปนเปื้อนการทดลอง พักจานเพาะเชื้อไว้ 30 นาทีถึงสองชั่วโมง จนกว่าสารละลายวุ้นจะเย็นตัวและแข็งตัว (เมื่อพร้อมจะมีลักษณะคล้ายเจลาติน)
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 3
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 3

ขั้นตอนที่ 3. แช่เย็นจานเพาะเชื้อจนพร้อมใช้

หากคุณไม่ได้วางแผนที่จะใช้จานเพาะเชื้อที่เติมวุ้นในทันที ก็ควรเก็บไว้ในตู้เย็นจนกว่าคุณจะพร้อมสำหรับการทดลอง

  • การจัดเก็บจานเพาะเชื้อในตู้เย็นจะป้องกันไม่ให้น้ำในจานระเหย (แบคทีเรียต้องการสภาพแวดล้อมที่ชื้นจึงจะเติบโต) นอกจากนี้ยังช่วยให้พื้นผิววุ้นแข็งตัวเล็กน้อย ซึ่งช่วยป้องกันการแตกหักหรือการเซาะร่องเมื่อถ่ายโอนตัวอย่างแบคทีเรียของคุณ
  • เมื่อเก็บจานเพาะเชื้อในตู้เย็น ควรวางคว่ำลง ซึ่งจะช่วยป้องกันไม่ให้เกิดการควบแน่นบนฝาปิดไม่ให้ตกลงไปในตัวอย่างและรบกวนพื้นผิวที่กำลังเติบโต
  • จานเพาะเชื้อพร้อมวุ้นสามารถเก็บไว้ในตู้เย็นได้นานถึงสองเดือน เมื่อคุณพร้อมที่จะใช้แล้ว ให้นำออกจากตู้เย็นและปล่อยให้อุณหภูมิถึงห้องก่อนที่จะแนะนำตัวอย่างของคุณ

ส่วนที่ 2 จาก 3: การเติบโตของแบคทีเรีย

ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 4
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 4

ขั้นตอนที่ 1. แนะนำแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ

เมื่อสารละลายวุ้นแข็งตัวและจานเพาะเชื้ออยู่ที่อุณหภูมิห้อง คุณก็พร้อมสำหรับความสนุกแล้ว นั่นคือการแนะนำแบคทีเรีย มีสองวิธีในการทำเช่นนี้ - ผ่านการสัมผัสโดยตรงหรือผ่านการรวบรวมตัวอย่าง

  • ติดต่อโดยตรง:

    นี่คือเมื่อแบคทีเรียถูกส่งไปยังจานเพาะเชื้อโดยใช้การสัมผัสโดยตรง เช่น การสัมผัสวุ้น วิธีหนึ่งที่ใช้บ่อยที่สุดคือกดปลายนิ้วของคุณ (ก่อนหรือหลังการล้างมือ) เบาๆ บนพื้นผิวของวุ้น อย่างไรก็ตาม คุณสามารถลองกดเล็บมือหรือพื้นผิวของเหรียญเก่าลงบนวุ้น หรือแม้แต่วางผมเล็กๆ หรือน้ำนมหยดลงบนจานก็ได้ ใช้จินตนาการของคุณ!

  • คอลเลกชันตัวอย่าง: ด้วยวิธีนี้ คุณสามารถรวบรวมแบคทีเรียจากแทบทุกพื้นผิวและถ่ายโอนไปยังจานเพาะเชื้อ สิ่งที่คุณต้องมีคือสำลีก้านสะอาด เพียงแค่ใช้สำลีก้านแล้วลูบบนพื้นผิวใดๆ ที่คุณนึกออก ไม่ว่าจะเป็นด้านในของปาก ลูกบิดประตู แป้นบนแป้นพิมพ์คอมพิวเตอร์หรือปุ่มบนรีโมทคอนโทรล จากนั้นจึงเกาพื้นผิวของวุ้น (โดยไม่ฉีกขาด มัน). สถานที่เหล่านี้เป็นแหล่งสะสมแบคทีเรียจำนวนมาก และควรให้ผลลัพธ์ที่น่าสนใจ (และน่าขยะแขยง) ภายในสองวัน
  • หากต้องการ คุณสามารถใส่ตัวอย่างแบคทีเรียมากกว่าหนึ่งตัวอย่างลงในจานเพาะเชื้อแต่ละจาน สิ่งที่คุณต้องทำคือแบ่งจานออกเป็นสี่ส่วน (สี่ส่วน) และเรียกใช้ตัวอย่างแบคทีเรียที่แตกต่างกันในแต่ละจาน
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 5
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 5

ขั้นตอนที่ 2 ติดฉลากและปิดผนึกจานเพาะเชื้อ

เมื่อคุณแนะนำแบคทีเรียแล้ว คุณควรปิดฝาบนจานเพาะเชื้อแล้วปิดด้วยเทปกาว

  • อย่าลืมติดฉลากจานเพาะเชื้อแต่ละจานด้วยแหล่งที่มาของแบคทีเรียในจาน มิฉะนั้นคุณจะไม่สามารถบอกได้ว่าอันไหน คุณสามารถทำได้โดยใช้ริบบิ้นและเครื่องหมาย
  • เพื่อเป็นการป้องกันไว้ก่อน คุณสามารถวางจานเพาะเชื้อแต่ละจานไว้ในถุงสุญญากาศ การทำเช่นนี้จะช่วยป้องกันแบคทีเรียที่เป็นอันตรายที่อาจก่อตัวขึ้นอีกชั้นหนึ่ง แต่ยังช่วยให้คุณสามารถดูเนื้อหาของจานเพาะเชื้อได้
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 6
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 6

ขั้นตอนที่ 3 วางจาน Petri ไว้ในที่อบอุ่นและมืด

ทิ้งจานเพาะเชื้อไว้ในที่อุ่นและมืดซึ่งแบคทีเรียสามารถเติบโตได้โดยไม่ถูกรบกวนเป็นเวลาหลายวัน อย่าลืมเก็บจานคว่ำเพื่อไม่ให้การเจริญเติบโตของแบคทีเรียไม่ถูกรบกวนจากหยดน้ำ

  • อุณหภูมิที่เหมาะสำหรับการเจริญเติบโตของแบคทีเรียคือระหว่าง 70 ถึง 98 องศาฟาเรนไฮต์ (20 ถึง 37 องศาเซลเซียส) หากจำเป็น คุณสามารถวางจานเพาะเชื้อในที่ที่เย็นกว่า แต่แบคทีเรียจะเติบโตช้ากว่ามาก
  • ปล่อยให้แบคทีเรียเติบโตเป็นเวลา 4 ถึง 6 วันเพราะจะทำให้มีเวลาเพียงพอสำหรับการเจริญเติบโต เมื่อแบคทีเรียเริ่มเติบโต คุณอาจสังเกตเห็นกลิ่นที่มาจากจาน
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 7
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 7

ขั้นตอนที่ 4 เขียนผลลัพธ์ของคุณ

หลังจากผ่านไปสองสามวัน คุณจะสังเกตเห็นแบคทีเรีย เชื้อรา และเชื้อราหลากหลายชนิดที่เติบโตภายในจานเพาะเชื้อแต่ละจาน

  • ใช้สมุดบันทึกเพื่อบันทึกข้อสังเกตของคุณเกี่ยวกับเนื้อหาในแต่ละจานและอาจสรุปได้ว่าสถานที่ใดมีแบคทีเรียมากที่สุด
  • มันอยู่ในปากของคุณหรือไม่? ที่จับประตู? ปุ่มบนรีโมท? ผลลัพธ์อาจทำให้คุณประหลาดใจ!
  • หากต้องการ คุณสามารถวัดการเติบโตของโคโลนีของแบคทีเรียในแต่ละวัน โดยใช้เครื่องหมายปลายสักหลาดเพื่อวาดวงกลมรอบแต่ละอาณานิคมที่ด้านล่างของจานเพาะเชื้อ หลังจากผ่านไปหลายวัน คุณควรมีชุดวงแหวนศูนย์กลางที่ด้านล่างของภาชนะแต่ละใบ
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 8
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 8

ขั้นตอนที่ 5. ทดสอบประสิทธิภาพของสารต้านแบคทีเรีย

รูปแบบที่น่าสนใจในการทดลองนี้คือการนำสารต้านแบคทีเรีย (เจลทำความสะอาดมือ สบู่ ฯลฯ) เข้าไปในจานเพาะเชื้อเพื่อทดสอบประสิทธิภาพ

  • เมื่อคุณแนะนำแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อแล้ว ให้ใช้สำลีก้านวางเจลฆ่าเชื้อมือ สบู่ฆ่าเชื้อ หรือสารฟอกขาวสักหยดเล็กๆ ตรงกลางตัวอย่างแบคทีเรีย จากนั้นทำการทดลองต่อไปตามปกติ
  • เมื่อแบคทีเรียในคราบจุลินทรีย์เติบโตขึ้น คุณควรเห็นวงแหวนหรือ "รัศมี" รอบๆ ตำแหน่งที่คุณวางสารต้านแบคทีเรียที่ไม่มีแบคทีเรียเติบโต สิ่งนี้เรียกว่า "เขตมรณะ"
  • สามารถวัดประสิทธิภาพของสารต้านแบคทีเรียต่างๆ ได้โดยการเปรียบเทียบขนาดของเขตฆ่าในจานเพาะเชื้อแต่ละจาน ยิ่งเขตการฆ่ามีขนาดใหญ่เท่าใด สารต้านแบคทีเรียก็จะยิ่งมีประสิทธิภาพมากขึ้นเท่านั้น

ส่วนที่ 3 จาก 3: การกำจัดแบคทีเรียอย่างปลอดภัย

ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 9
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 9

ขั้นตอนที่ 1 ใช้มาตรการป้องกันความปลอดภัยที่เหมาะสม

ก่อนกำจัดจานเพาะเชื้อของคุณ คุณต้องใช้มาตรการป้องกันความปลอดภัยที่เหมาะสมก่อน

  • แม้ว่าแบคทีเรียส่วนใหญ่ที่คุณเติบโตจะไม่เป็นอันตราย แต่อาณานิคมของแบคทีเรียขนาดใหญ่อาจมีความเสี่ยงมากกว่า ดังนั้น คุณจะต้องฆ่าพวกมันก่อนกำจัดโดยใช้สารฟอกขาว
  • ปกป้องมือของคุณจากสารฟอกขาวด้วยการสวมถุงมือยาง ปกป้องดวงตาของคุณด้วยแว่นตาพลาสติก และปกป้องเสื้อผ้าของคุณด้วยการสวมผ้ากันเปื้อน
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 10
ปลูกแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อ ขั้นตอนที่ 10

ขั้นตอนที่ 2. เทสารฟอกขาวลงในจานเพาะเชื้อ

เปิดจานเพาะเชื้อและค่อยๆ เทสารฟอกขาวจำนวนเล็กน้อยลงบนอาณานิคมของแบคทีเรีย โดยถือจานไว้เหนืออ่างล้างจาน นี้จะทำลายแบคทีเรีย

  • ระวังอย่าให้สารฟอกขาวสัมผัสผิวหนังเพราะอาจไหม้ได้
  • จากนั้นใส่จานเพาะเชื้อที่ฆ่าเชื้อแล้วกลับเข้าไปในถุงพลาสติกสุญญากาศแล้วทิ้งลงในถังขยะ

เคล็ดลับ

ลองใช้ BDA เป็นสื่อในการเติบโต เตรียมมันฝรั่งเดกซ์โทรสขนาดกลางโดยต้มมันฝรั่ง 20 กรัม วุ้น 4 กรัม และเดกซ์โทรส 2 กรัมลงในบีกเกอร์ ใส่สารละลายนี้ลงในจานเพาะเชื้อแล้วปล่อยให้แห้ง นำสำลีก้านที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วมาถูที่ใดก็ได้ (รีโมทคอนโทรล ที่จับประตู ท่อน้ำ ฯลฯ) ปิดจานเพาะเชื้อด้วยพลาสติกแรป. ปล่อยให้ฟักตัวเป็นเวลา 24 ชั่วโมงในที่อบอุ่น วันรุ่งขึ้น ตรวจสอบจานเพาะเชื้อ คุณควรจะสามารถเห็นอาณานิคมของแบคทีเรียได้

ประกาศ

ห้ามวางสิ่งของใดๆ บนจานที่มีแนวโน้มว่าจะทำให้เกิดแบคทีเรียที่เป็นอันตราย (ของเหลวในร่างกาย ไม่เคย ควรวางในจานเพาะเชื้อ) หากเปิดจานอีกครั้งอาจทำให้เกิดการเจ็บป่วยที่รุนแรงได้

แนะนำ: